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產(chǎn)品名稱:海藻糖含量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):BC0335

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):海藻糖含量檢測(cè)試劑盒 微量法
測(cè)定方法采用蒽酮比色法。具有簡便快捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。但是蒽酮比色法也存在一定缺陷,如果樣本中含有可溶性糖,則會(huì)影響測(cè)定。本試劑盒建議用于除海藻糖外不含其他可溶性糖樣本的測(cè)定。

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BC0335海藻糖含量檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

 

產(chǎn)品名稱:海藻糖含量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名: Micro Trehalose Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào):BC0335        產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣        產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價(jià)格:840
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:    海藻糖檢測(cè)試劑盒| | 海藻糖|試劑盒

簡要介紹:
海藻糖存在于大量有機(jī)體中,包括細(xì)菌、藻類、酵母、植物、昆蟲和其他無脊椎動(dòng)物。由于海藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物學(xué)特性,能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質(zhì)等惡劣環(huán)境下保護(hù)生物體細(xì)胞蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存;
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1支,含10mg海藻糖。
產(chǎn)品說明
海藻糖存在于大量有機(jī)體中,包括細(xì)菌、藻類、酵母、植物、昆蟲和其他無脊椎動(dòng)物。由于海藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物學(xué)特性,能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質(zhì)等惡劣環(huán)境下保護(hù)生物體細(xì)胞蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。
測(cè)定方法采用蒽酮比色法。具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。但是蒽酮比色法也存在一定缺陷,如果樣本中含有可溶性糖,則會(huì)影響測(cè)定。本試劑盒建議用于除海藻糖外不含其他可溶性糖樣本的測(cè)定。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿﹑研缽、濃硫酸和蒸餾水。

操作步驟:
一、海藻糖提取:   

  1. 細(xì)菌或細(xì)胞處理:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,常溫離心,取上清。
  2. 組織的處理:稱取約0.1g樣本,常溫研碎,加入1mL提取液,室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,常溫離心,取上清。
  3. 血清(漿)的處理:吸取約100μL血清(漿),加入0.9mL提取液,室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,常溫離心,取上清。
  4. 標(biāo)準(zhǔn)品的處理:標(biāo)準(zhǔn)品用1mL雙蒸水溶解,溶液濃度為10mg/mL,稀釋到0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0mg/mL。

二、測(cè)定操作表:

  1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,波長調(diào)節(jié)620nm,蒸餾水調(diào)零。調(diào)節(jié)水浴鍋95℃。
  2. 工作液的配制:臨用前在每瓶試劑一中加入7mL蒸餾水后,緩慢加入28mL濃硫酸,不斷攪拌,充分溶解,待用。用不完的試劑4℃保存一周。
  3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:取60mL標(biāo)準(zhǔn)液和240mL現(xiàn)配的工作液混勻,95℃水浴10 min,(蓋緊,防止水分散失)自然冷卻室溫,取200mL比色皿或酶標(biāo)板中,在620nm處測(cè)吸光值A(chǔ)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)樣本的濃度(y)和吸光度(x)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
  4. 樣本測(cè)定:取60mL樣本和240mL現(xiàn)配的工作液混勻,95℃水浴10 min,(蓋緊,防止水分散失)自然冷卻室溫,取200mL比色皿或酶標(biāo)板中,在620 nm 波長下測(cè)定吸光度值為A。

若吸光值大于1,請(qǐng)將樣本用提取液適當(dāng)稀釋。后計(jì)算時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 
三、海藻糖含量計(jì)算:
使用微量比色皿時(shí),計(jì)算公式如下:
1、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中海藻糖的含量y(mg/mL)。
2、按樣本鮮重計(jì)算:
海藻糖含量(mg/g 鮮重)= V1×y÷(W×V1÷V2)=y ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計(jì)算:
海藻糖含量(mg/mg prot)=V1×y÷(V1×Cpr)=y÷Cpr。
4、按細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
海藻糖含量(μg/104 cell)=1000 × V1 × y÷(500 × V1÷V2)=2× y
5、血清(漿)海藻糖含量計(jì)算
海藻糖含量(mg/mL)=V1×y÷(V3×V1÷V2)=10×y
V1: 反應(yīng)體系中樣本體積,0.06mL;V2:提取液總體積,1mL;V3:血清、血漿體積,0.1mL;Cpr:樣本蛋白濃度mg/mL;W:樣本質(zhì)量g;500細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500萬;1000:單位換算系數(shù),1mg/mL=1000mg/mL
 注意:低檢測(cè)限為10μg/g 鮮重或0.1μg/mg prot。

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海藻糖含量檢測(cè)試劑盒

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