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產(chǎn)品名稱:E010100 TS-UNG 溫度敏感型UNG酶

產(chǎn)品型號:

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點(diǎn):E010100 TS-UNG 溫度敏感型UNG酶
產(chǎn)品介紹
TS-UNG酶基因來源于低溫微生物,經(jīng)大腸桿菌重組表達(dá)獲得的新型溫度敏感型UNG酶。該酶與常規(guī)UNG酶相同,能夠催化含尿嘧啶的單鏈和雙鏈DNA釋放游離尿嘧啶,對RNA無活性,主要應(yīng)用于PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的防污染。

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E010100 TS-UNG 溫度敏感型UNG酶的詳細(xì)資料:

E010100  TS-UNG 溫度敏感型UNG酶 

產(chǎn)品介紹: 

TS-UNG酶基因來源于低溫微生物,經(jīng)大腸桿菌重組表達(dá)獲得的新型溫度敏感型UNG酶。該酶與常規(guī)UNG酶相同,能夠催化含尿嘧啶的單鏈和雙鏈DNA釋放游離尿嘧啶,對RNA無活性,主要應(yīng)用于PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的防污染。TS-UNG酶與常規(guī)UNG酶相比,對溫度敏感、易于滅活,從而避免了常規(guī)UNG酶滅活后殘留活性對熒光PCR靈敏度及擴(kuò)增產(chǎn)物的降解作用。

TS-UNG酶可以在25℃~50℃范圍內(nèi)使用,在37℃左右具有大反應(yīng)活性。建議在37℃,10min消化含dUTP模板,在50℃,10min或95℃,2min進(jìn)行滅活。利用TS-UNG酶低溫消化、低溫滅活的特性,TS-UNG酶可以用于RT-PCR防止擴(kuò)增污染。

活性定義:
37℃條件下,1小時降解1μg含dU堿基的單鏈DNA的酶量為1單位。

規(guī)格:1U/μl

儲存緩沖液:
20 mM Tris-HCl,pH 7.5(25℃),100 mM NaCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.1% Triton X-100,50% glycerol. 

保存條件:
保存于-20℃。并避免保存時反復(fù)凍融。

反應(yīng)條件:

1、反應(yīng)體系:


Component

Volume per

Reactionμl

Concentration in Master Mix

Template

*

< 1μg/reaction

Primer 1

1~5

0.2~1.0μM

Primer 2

1~5

0.2~1.0μM

d NTPs

(replace dTTP for 200μM~600μM dUTP) 

1

200μM(dATP、dGTP、dCTP)

10×PCR Buffer

5

25mM MgCl2

2~8

1.0~4.0mM

 Taq5U/μl

0.25

1.25U

TS-UNG(1U/μl

0.2~0.5

0.2~0.5U

H2O

*

——

Total volume

50μl


2、Incubate the product for 10min at 37℃;

3、Inactivate TS-UNG by heating to 50℃ for 10min,or 95℃ for 2min;

質(zhì)量控制:

1、SDS-PAGE電泳純度大于98%;

2、無核酸外切酶和核酸內(nèi)切酶活性、RNase酶活性;

注意事項(xiàng):
1、由于不同目的基因堿基組成不同,因此對TS-UNG酶的敏感度也不同,建議根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,在0.2~0.5U之間選擇TS-UNG適合用量。

2、避免多次凍融,切勿暴露在溫度波動較大之處。溫度波動對產(chǎn)品的穩(wěn)定性有極大影響。3、TS-UNG酶可以在PCR反應(yīng)前清除不慎污染的U-DNA分子。為有效防止污染,一個實(shí)驗(yàn)室必須在所有的PCR反應(yīng)中均使用dUTP作為dNTPs組分之一進(jìn)行擴(kuò)增,使所有擴(kuò)增產(chǎn)物都成為U-DNA。 

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