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Solarbio-聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒
本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料和*的緩沖液系統(tǒng)，從聚丙烯酰胺凝膠上回收DNA的片段，同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。使用本試劑盒回收的DNA可適用于后續(xù)各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測(cè)序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。
操作步驟：
*次使用前請(qǐng)先在15ml漂洗液中加入60ml無水乙醇，所有離心步驟均可使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。
1．將單一的目的DNA條帶從聚丙烯酰胺凝膠中切下（盡量切除多余部分），放入1.5ml離心管中，稱取重量，用研磨杵將膠盡量擠壓碎。加入2倍體積的溶液A吹打混勻（每100mg膠加入200ul溶液A），75℃水浴30分鐘。
2．用1ml的去尖吸頭吸取混合物過濾柱中（將膠一起吸入，溶液過多時(shí)可分次加入）。13,000rpm離心1分鐘。將收集管中的濾出液轉(zhuǎn)入新離心管中。
3. 取六倍體積溶液B加入原離心管中（每100mg膠加入600ul），清洗管壁后加入過濾柱中(溶液過多時(shí)可分次加入)，顛倒過濾柱或輕輕吹打幾次混勻，13,000rpm離心1分鐘。將所有收集的濾出液混合。
4．將總濾出液混勻后加入吸附柱中（溶液過多時(shí)可分次加入），13,000rpm離心30-60秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。
5．向吸附柱中加入600μl漂洗液（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇），13,000rpm離心30-60秒，倒掉廢液，將吸附柱重新放入收集管中。
6．向吸附柱中加入600μl漂洗液，13,000rpm離心30-60秒，倒掉廢液。
7．將離心吸附柱放回收集管中，13,000rpm離心2分鐘，盡量除去漂洗液。將吸附柱開蓋置于室溫1-2分鐘，*晾干，以防止殘留的漂洗液影響下一步的實(shí)驗(yàn)。
8．將吸附柱放到一個(gè)干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加適量65–70℃預(yù)熱的洗脫緩沖液20-30μl，
影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證其 pH 值在 7.0-8.5 之間。
-20℃保存。
3． 50bp DNA 的片段回收效率偏低（30%左右），如要回收，應(yīng)加大結(jié)合液的體積，延長吸附和洗
初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。
相關(guān)
19:1）
液
E1027 EB 清除劑
室溫放置2分鐘。13,000rpm離心2分鐘收集DNA溶液。注意：①為了增加回收效率，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，13,000rpm再次離心1分鐘。②洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于20μl，體積過小影響回
收效率。③洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大
9．DNA回收產(chǎn)物直接后續(xù)實(shí)驗(yàn)或者

Solarbio-聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒
注意事項(xiàng)：
1．電泳時(shí)好使用新的電泳緩沖液，以免影響電泳和回收效果。
2．切膠時(shí)，紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短，以免對(duì)DNA造成損傷。 本試劑盒對(duì)<脫的時(shí)間。
5．回收率

產(chǎn)品：
A1020 40%丙烯酰胺（
A1030 10%過硫酸氨
T1050 5×TBE 緩沖
E1020 EB染色液