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膠原酶Ⅴ 酶類包含少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它可用于胰腺小島組織的分離，將結(jié)締組織分離成單個細(xì)胞。

      膠原酶Ⅴ溶解性：可溶于TES緩沖液，Hank's平衡鹽和Earles平衡鹽等溶液。溶液在-20℃可穩(wěn)定保存數(shù)月。

      （來源溶組織梭菌）包含少 7 種蛋白酶成分，分子量從 68-130KD 不等。它可用于胰腺小島組織的分離， 將結(jié)締組織分離成單個細(xì)胞。消化軟骨組織的濃度一般為 1-2 mg/ml，消化肝臟組織大約 1 mg/ml。 但是具體的消化濃度因種屬特異性而異。很多文獻指出膠原酶可以消化多種組織，膠原酶的使用濃 度一般為 0.1- 5 mg/ml，消化過程中可以攪拌以促進酶的消化作用。膠原酶在消化的過程中可以引起 細(xì)胞的少量死亡，一般消化時間為 15min 數(shù)小時。如果濃度發(fā)生變化那么消化時間可能更長。消化過程中一般選的緩沖液為含鈣離子和 BSA 的 Krebs Ringer Buffer。 在消化的過程中如果細(xì)胞大量死亡則需要降低酶量，同時可以加入0.5%BSA或5-10%血清來穩(wěn)定細(xì)胞的狀態(tài)和消化效果。膠原酶的滅菌先離心或者用0.8µm的濾器去掉不溶物。然后再用0.2µm 的濾器過濾除菌。 對于組織培養(yǎng)方面的應(yīng)用，膠原酶可以用不含鈣離子的溶液配制如hanks，ebss等。

       0.05 - 0.1 mg/ml 膠原酶溶于50 mM TES buffer，pH 7.4 (37 ℃) 含 0.36 mM 氯化鈣。反應(yīng)體系 的終濃度為50 mM TES，0.36 mM 氯化鈣，25 mg 膠原，0.005-0.01 mg 膠原酶。

       酶液在含有 0.3-0.5 mM 鈣離子的中性 PH 條件下可以在 37 ℃維持活性 15 小時。在-20℃可以維 持?jǐn)?shù)月。

相關(guān)文獻：

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《Dihydrotestosterone synthesis in the sheep corpus luteum and its potential mechanism in luteal regression》 作者:Longfei Xiao  Liangli Song  Junjie Hu  Quanwei Zhang  Yuting Jiang  Hongwei Duan  Yong Zhang Xingxu Zhao  Yongli Hua 期刊:Wiley Online Library 影響因子: PMID:30671954
《Hypoxia-Inducible Factor 1-α (HIF-1α) Induces Apoptosis of Human Uterosacral Ligament Fibroblasts Through the Death Receptor and Mitochondrial Pathways》 作者:Xinrui Zhao, Lidong Liu, Rui Li, Xuan Wei, Wenqing Luan,Peishu Liu, and Jing Zhao 期刊:Medical Journal of Experimental 影響因子:1.42 PMID:
 

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