青鏈霉素混合液的使用說明
使用說明
1、溶液P1在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入)，混勻，置于2-8℃保存。
2、*次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在漂洗液中加入無水乙醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇)。
3. 使用前請先檢查溶液P2、P3和P4是否出現(xiàn)混濁，如有混濁現(xiàn)象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，待溶液恢復澄清后再使用。
4. 洗脫緩沖液體積不應少于50ul，體積過小影響回收效率；洗脫液的pH值對洗脫效率也有影晌，若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)此范圍)， pH值低于7. 0會降低洗脫效率。 DNA產(chǎn)物應保存在-20℃，以防DNA降解。
5. 質(zhì)粒DNA濃度＞1mg/ml時清除內(nèi)毒素效率降低。由于質(zhì)粒DNA本身的性質(zhì)，清除過程可導致部分質(zhì)粒DNA丟失，但內(nèi)毒素卻能得到大限度清除。
6. 所有溶液應用無內(nèi)毒素的高純水配制，所有器械材料均應不含內(nèi)毒素，玻璃器皿可高溫烘烤，非揮發(fā)性水溶液可高壓處理。
7. DNA濃度及純度檢測：得到的質(zhì)粒DNA純度與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。 得到的DNA可用瓊脂糖疑膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。 DNA應在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當于大約50μg/ml雙鏈DNA、 40μg/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響吸光值，但并不表示純度低。
青鏈霉素混合液用于預防細胞培養(yǎng)的細菌污染，特別是革蘭氏陽性和陰性細菌的污染。產(chǎn)品經(jīng)過濾除菌處理，可以直接添加到細胞培養(yǎng)液內(nèi)。青霉素的含量為10kU/ml，鏈霉素的含量為10mg/ml。在細胞培養(yǎng)液中推薦的青霉素的工作濃度為100U/ml，鏈霉素的工作濃度為0.1mg/ml。即按照100倍稀釋使用即可
